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回复shameman网友兼外行ultra网友的问题

天行健

shameman网友太客气了，大家平等交流嘛，我是一个年轻人（不知道是不是只是自己认
为，真正的年轻人早看我象个老头子了，呵呵，不过我今年尚<35），这么客气的称呼
可省去，更自在些。言归正传，shameman网友问到如何取小鼠血的问题，我们一般是不
从小鼠身上抽血的，而是取血时剪断鼠尾尖，挤出血来收集，一般1周1次的时候要少取
点，怕影响小鼠，1次取的血约能分离10微升血清；如果1月取1次血时下手就会狠点，1
次取的血约能分离20微升以上的血清。这种取血方法请参看实验动物学书籍，是搞肿瘤
或是制备杂交瘤单抗时测定免疫小鼠血清抗体效价的经典取血方法。至于shameman网友
询问自动血生化分析仪是什么牌子型号的问题，据我所知，从1999到现在的大多数（不
敢说全部，我也没都见识过所有品牌）全自动生化分析仪（尤其是临床使用的），都可
以完成单指标只需2微升血样级别的检测。shameman网友提到的1ml样品量估计有2种可
能，一种是非要采用最大加样量测定几乎所有的血生化指标，大约刚好20项左右，除肝
肾功能还包括了血脂4项和肌酶谱5项，这样大约需要1ml血清；另一种可能是检验科的
人忽悠你，他们经常这么干，宁多勿少，象测个转氨酶加2对半，明明50微升之内也能
测，他们非要抽你整整5ml的血（呵呵，不过他们也是为了保险，能在出错时还能进行
重复实验）。

说到这里，顺便回答一下ultra网友的问题，当时我写的时候就犹豫了一下，在说报药
的较全面检查时要不要分开说清楚，但想我反正已经在血生化里面写了就没去修改，结
果ultra网友就误解了。我们在进行一般实验观察肾功时，主要关注的是较严重的肾炎
和损伤，所以一般是测定尿中的红细胞和尿蛋白含量，或者再搭上一个pH，只有申报新
药时要求严格才做血中的尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、肌酐(Cre)全套
的。况且肌酐主要是看肾透析性能，化学药比较关心，生物药关心的少点。尿素则受到
的其它影响因素太多，很容易自然波动，也不灵敏，我们也较少关心。至于各单项指标
需要的样品量可以少至2个微升，如果实在不够，我们还可以用已经测定过的等同样品
稀释后测定，再换算回去，不过一般情况下即使是测肝功肾功的全套也差不多够了。

好了，回到shameman网友的问题：10-250kDa蛋白Marker是不是2000年就有的疑问上
来。我的回答是第一，2000年以前确实就有了，已经很多年了，魏先生也不需要来个
“Back to the Future”来购买。第二，这个问题跟Marker没关系，因为这是由PAGE的
分子量分辨范围决定的，我只是想提醒司先生在同一块PAGE胶上是可以同时跑出
21-220kDa分子量的蛋白的，其实好多文献上都有，可是哪有这两家公司的订货目录来
的方便，做这一行的人手边总会有一本的，随手一翻即可。

好了，问题解答完毕。不过我还有点题外话，做了这些年的研究，我发现有很多生物学
实验成败的关键确实是难以解释的，往往细节决定一切，因为一个非常非常难以被关注
的细节的不同，往往会得到截然不同的结果。所以，正如我在以前的文章里所说的那
样，多看看、多想想，总是会有好处的。不知道众位网友有没有人认真地思考过，一个
经多聚甲醛的醛氨缩合反应交联所有蛋白的细胞，与一个可裂解后产生可溶性蛋白的细
胞，以及1个可溶性的蛋白分子，在抗原呈递的过程中，会有什么样不同的表现呢？它
们在诱导体液免疫反应和细胞免疫反应方面又会有什么样的不同呢？我期待真正的高手
为我解惑。

(XYS20060418)

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