◇◇新语丝(www.xys.org)(xys5.dxiong.com)(www.xinyusi.info)(xys2.dropin.org)◇◇ 对朱蓓薇教授利用海参自溶现象获取2005年度国家技术发明二等奖的质疑 作者:david 朱蓓薇,大连工业大学食品工程学院院长、教授、博士生导师,日本冈山大学农 学博士,她主持的“海参自溶酶技术及其应用”曾获得2005年度国家技术发明二 等奖[1]。 在朱蓓薇所工作的大连工业大学的学报报道:“海参自溶酶技术及其应用”研究 揭示的海参自溶的本质是其自身存在的海参自溶酶的存在,研究结果表明海参自 溶酶是具有蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、褐藻酸酶和脂肪酶的活力的复 杂酶系。用于海参深加工的自溶酶技术的核心内容是,通过控制温度、时间、pH 等条件,并使用酶抑制剂、金属离子及射线照射等手段,实现对自溶过程的发生、 进行和终止的控制。该研究自1997年起,得到国家星火计划和省市重大攻关项目 的立项支持。研究成果共申报国家发明专利9项,授权发明专利6项。该成果在多 家企业实现产业化,截至2004年12月,已累计创造产值近2亿元[2]。 动物的自溶(autolysis)现象不仅发生在海参,其他动物也有发生。所谓自溶是 一个细胞或一些细胞的内含物通过自己的水解酶作用的自我毁灭。这一过程特别 显著的是细胞的形态变化并涉及溶酶体(lysosome)[3]。溶酶体得名于希腊字 lysis 和soma,lysis意思是分解或破坏;soma意思是(形)体。由于溶酶体的 自溶作用,生物学家经常昵称它为“自杀包”、“自杀囊”。 溶酶体被比利时 细胞学家Christian de Duve 在1949年发现并在1949年至1955年期间对溶酶体进 行了大量研究[4]。到目前为止,人们对溶酶体的了解已经比较清楚。溶酶体的 酶都有一个共同的特点∶都是水解酶类,在酸性pH条件下具有最高的活性。溶酶 体的酶包括∶蛋白酶、核酸酶、脂酶、糖苷酶等,主要类型的酶列于表1。刺参 血管上皮细胞中的自噬体中包裹着脂滴、高尔基体、线粒体、内质网和溶酶体颗 粒,这种自噬体细胞通过分泌自噬体的自噬作用清除细胞内过剩的分泌成分和参 与合成分泌物的细胞器,以维持机体正常的激素合成与分泌[5] 表1 溶酶体的主要酶类 酶 天然底物 酶 天然底物 磷酸酶类 酸性磷酸酶 磷酸单脂 酸性磷酸二脂酶 磷酸二脂 酸性焦磷酸酶 ATP, FAD 磷脂酸磷酸酶 磷脂酸 磷酸蛋白磷酸酶 磷酸蛋白 硫酸酯酶 芳基硫酸酯酶 芳基硫酸酯 蛋白酶和肽酶 组织蛋白酶 蛋白质 胶原酶 胶原 肽酶 肽 核酸酶 核糖核酸酶 RNA 脱氧核糖核酸酶 DNA 脂酶 磷酸脂酶 磷脂 酯酶 脂肪酸酯 β-葡萄糖脑苷脂酶 葡萄糖脑苷脂 糖苷酶 α葡萄糖苷酶 糖原 β葡萄糖苷酶 糖蛋白 β-半乳糖苷酶 糖脂、糖蛋白 溶菌酶 溶菌酶 细菌的细胞壁 1.到目前为止,从国内外文献上未发现溶酶体中含有纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、 褐藻酸酶。 朱蓓薇的海参自溶酶的复杂的酶系中所包含的酶与国内外文献中所 报道的酶有很大的不同。要么这是重大的科学发现,要么这是胡编乱造。 2. 在2004年,朱蓓薇的研究认为海参自溶酶为一种酶并获得了其分子质量。朱蓓 薇(2004年)分离存在于海参(Holothurians)的自溶酶并研究了其部分性质 [7][8] :采用阴离子交换柱(DEAE252) 层析,得到在SDS2聚丙烯酰胺电泳 (SDS2PAGE) 上表现为一条带的海参自溶酶样品。海参自溶酶为酸性蛋白酶,其等 电点在pH6. 0 以下;分子量约为68. 5 kDa [6]利用 Sephadex-100 分子筛柱层 析从新鲜海参肠中分离纯化海参自溶酶。酶蛋白在SDS2聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈 现1 条色谱带,证明其为纯酶,且分子质量约为68.5 ku。所纯化的酶为酸性蛋白酶, 分子质量约为68.5 ku[7]。 图1 海参自溶酶的SDS2PAGE 图   图2 海参自溶酶SDS2PAGE 图 发表在大连轻工业学院学报[6] 发表在食品与发酵工业[7] 从朱蓓薇发表的科学论文[6][7]中,她证实了海参自溶酶是一种蛋白质,并以此 为理论和材料基础进行了广泛的海参自溶酶技术推广和应用。 3.从以上图1和图2中,我们看不出发表在两个不同杂志上的论文有何不同,只是 海参自溶酶蛋白的分子质量的单位不同。在图1中样品18和37是纯的海参自溶酶 蛋白,在图2中样品58和61的也是纯的海参自溶酶蛋白,进一步证实了海参自溶 酶是一种蛋白。 4.朱蓓薇在获得2005年度国家技术发明二等奖的海参自溶酶技术及其应用项目中 海参自溶酶是具有蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、褐藻酸酶和脂肪酶的活 力的复杂酶系。读者非常迷惑不解,2004年发表的科学论文中海参自溶酶是一种 蛋白质,并确定了分子质量。怎么到了2005年,海参自溶酶成为具有蛋白酶、纤 维素酶、果胶酶、淀粉酶、褐藻酸酶和脂肪酶的活力的复杂酶系了。 5.到2005年止,在朱蓓薇所有的公开的科学研究论文和专利中未发现她研究纤维 素酶、果胶酶、淀粉酶、褐藻酸酶和脂肪酶作为海参自溶酶中的酶(如表2),也 未发现她对这些酶对海参组织或细胞具有降解作用。 表2 朱蓓薇所申请或获得有关海参的中国专利[8] 专利号 专利名称及摘要 99113247.5 一种海参酶解液系列产品及其加工方法 本发明涉及一种海参酶解液系列产品及其加工方法,其特点是该酶解液的组分及 重量百分比含量分别为:2—10肽的活性肽类5%~20%。氨基酸10%~55%、海 参甙0.1%~1.5%、粘多糖0.5%~5%和水余量。该酰解液制备方法采用双 酶水解或单酶水解,水解度为50%~75%,其中5%~20%可水解为2—10肽的活 性肽。以该酶解液为基液,配以0%~60%的添加剂制成海参营养系列产品,使 其具有易消化吸收,抗衰老,降血压等功效。 200710157812.7 海参肠中溶菌酶的分离纯化技术 本发明涉及从废弃的海参肠中提取精制海参肠溶菌酶的方法。是用海参肠经过匀 浆、2%TritonX-114溶液浸提、透析、CM52纤维素柱吸附和洗脱、 Sephadex-G75层析柱吸附和洗脱、干燥而得。海参肠溶菌酶的提取方法易于规模 化生产,且产品成本低、得率高,安全性好及稳定性高,特别是将废弃的海参肠 利用起来,既避免了环境污染又使其得到与鸡蛋白溶菌酶相比,具有嗜低温、抗 氧化及溶菌谱广的特点的棘皮类溶菌酶,在医药、食品工业及生物高新技术产业 等领域有独特优势和广阔的应用前景。 200710159244.4 海参复合营养食品及其的制备方法 一种海参复合营养食品,以鲜海参酶解法提取海参有效成分海参多糖与黑木耳、 大枣、枸杞子、山楂、菊花、酸枣、乌梅、冬虫夏草的水提取物和黑芝麻制成食 补膏、羹类型的食品。黑木耳也可用水浸法提取黑木耳多糖、大枣也可以用酶解 法提取大枣多糖使用。其中以海参多糖、黑木耳多糖与大枣、枸杞子、山楂、菊 花、冬虫夏草的水提取物制成海参浸膏适合老人;以海参多糖、黑木耳多糖、大 枣多糖和枸杞子、山楂、菊花、酸枣的水提取物制成海参浸膏适合妇女;以海参 多糖、黑木耳多糖和大枣、山楂、酸枣、乌梅的水提取物和黑芝麻、琼脂、蜂蜜 制成海参羹适合儿童。本发明不仅在功能上提高了产品的营养价值,同时也从医 学角度提高了产品的药用价值。 200710159245.9 海参胶原、胶原蛋白的提取方法 一种海参海参胶原、胶原蛋白的制备方法,是将海参经过水溶液、Tris-HCl 溶 液、NaOH溶液处理后冷冻或冻干,得到海参粗胶原纤维。得到的粗胶原纤维,加 入乙酸溶液及胃蛋白酶,在0~5℃的条件下搅拌酶解,冷冻离心后进行盐析纯化, 之后用Na2HPO4、乙酸、水除盐后得到活性胶原。得到的粗胶原纤维,加入乙酸 溶液及蛋白酶,在6~25℃的条件下搅拌酶解,离心后进行盐析纯化,之后用 Na2HPO4、乙酸、水除盐后得到胶原蛋白。 200810010115.3 海珍品发酵食品及其制法 海珍品发酵食品,是先将海珍品超微破碎,加入2~4‰菠萝蛋白酶或木瓜蛋白酶, pH5.0~6.5,40~65℃下酶解,灭酶后用活性碳脱腥得到酶解液,其中富含海珍 品活性多和粘多糖。再将大豆粉碎与麸皮混合润水、蒸熟,经制曲、发酵制酱油 时,用含海珍品酶解液水浇淋、淋油,制得海珍品营养酱油含海珍品粘多糖0.1 ~0.5%,多肽0.2~2.0%。同样,将大豆煮至软烂状任其自然发酵后,将含有 酶解液的食盐水发酵而成海珍品营养酱,含海珍品粘多糖0.08~ 0.25%;含多 肽0.3~1.0%。利用自溶酶技术获得的海珍品功能性营养成分,加入到发酵食品 的制作中,提高了发酵食品的品质。 200410054773.4 富含海参粘多糖食品及其制备方法 一种富含海参粘多糖食品及其制备方法,它主要是以海参为原料,采用碱解,单、 双外源酶酶解或自溶酶与外源酶结合酶解,然后对分离的母液进行醇溶,提纯, 制得粘多糖纯品。将该粘多糖加到酒中,可得海参酒;将该粘多糖与中药提取液 混合,经浓缩、制粒、烘干可得冲剂;将该粘多糖与中药提取液混合,经澄清、 调味、过滤、灭菌得口服液;将该粘多糖与中药提取液混合,加入淀粉压片得片 剂;将该粘多糖与β-环状糊精混合煮沸,经真空干燥后包装可得胶囊。本发明 将海参中少量的粘多糖提取出来,将其制成具有一定含量的功能食品,以便使其 充分发挥抗癌及提高免疫力的作用。 200410069576.X 富含海参粘多糖食品及其制备方法 一种富含海参粘多糖食品及其制备方法,它主要是以海参为原料,采用碱解, 单、双外源酶酶解或自溶酶与外源酶结合酶解,然后对分离的母液进行醇溶,提 纯,制得粘多糖纯品。将该粘多糖加到酒中,可得海参酒;将该粘多糖与中药提 取液混合,经浓缩、制粒、烘干可得冲剂;将该粘多糖与中药提取液混合,经澄 清、调味、过滤、灭菌得口服液;将该粘多糖与中药提取液混合,加入淀粉压片 得片剂;将该粘多糖与β-环状糊精混合煮沸,经真空干燥后包装可得胶囊。本 发明将海参中少量的粘多糖提取出来,将其制成具有一定含量的功能食品,以便 使其充分发挥抗癌及提高免疫力的作用。 02132777.7 即食海参食品及其制备方法 一种即食海参食品及其制备方法,其采用经热烫和盐渍后的鲜海参为原料,清洗 后于18-20℃温度浸渍15-24小时脱盐。先于40-45℃温度水中略洗后于100℃水中 热烫2-10分钟,趁热放入着味汤料中浸渍2-6小时,该着味汤料中含有0.1-0.3% 的复合磷酸盐及各种风味的汤剂。着味后的海参于60-80℃温度干燥至含水量在 50-60%为止。将干燥后的着味海参装入耐高温塑料袋中,在真空度为0.1Mpa的 真空包装机上封口。之后采用15′-20′-15′/121℃杀菌式杀菌,将杀菌后的包 装袋置于冰水中迅速冷却到室温。本发明的加工方法快捷,可基本保留海参的营 养物质。本发明的产品开袋即食十分方便,不仅回味无穷而且还去掉海参的腥味。 同时也易于携带和运输。 02132846.3 富含海参粘多糖食品及其制备方法 一种富含海参粘多糖食品及其制备方法,它主要是以海参为原料,采用碱解,单、 双外源酶酶解或自溶酶与外源酶结合酶解,然后对分离的母液进行醇溶,提纯, 制得粘多糖纯品。将该粘多糖加到酒中,可得海参酒;将该粘多糖与中药提液取 混合,经浓缩、制粒、烘干可得冲剂;将该粘多糖与中药提取液混合,经澄清、 调味、过滤、灭菌得口服液;将该粘多糖与中药提取液混合,加入淀粉压片得片 剂;将该粘多糖与β-环状糊精混合煮沸,经真空干燥后包装可得胶囊。本发明 将海参中少量的粘多糖提取出来,将其制成具有一定含量的功能食品,以便使其 充分发挥抗癌及提高免疫力的作用。 200810013426.5 海参卵营养品及其制备方法 海参卵营养品及其制备方法,海参卵营养品为白色或淡黄色固体粉末,无臭、无 味,易溶于水和乙醇,有吸湿性。其制备方法是由海参卵、肠经破碎、酶解、离 子交换去除金属离子、冷冻干燥制成。其中所述酶解是采用外源酶和内源酶结合 酶解或单用外源酶酶解,单用外源酶酶解是使用单一胃蛋白酶或使用胰蛋白酶、 中性蛋白酶和碱性蛋白酶混合。本发明的突出特点是将传统方法加工海参的废弃 物经过加工处理成极富营养价值的滋补品,同时还减少废弃物对环境的污染。加 工处理的工艺合理、简单、易于实现工业化。 6.目前在国际和国内市场上未发现有海参自溶酶出售。也未发现国内哪个企业在 生产任何形式(干粉或液态)的海参自溶酶。如果生产相关海参产品的企业未利 用海参自溶酶,这些生产海参产品的企业如何利用“海参自溶酶技术及其应用”, 这一2005年度国家技术发明二等奖成果进行生产而产生巨大经济效益呢? 7.海参自溶酶技术到底是什么?发明人朱蓓薇,邵俊杰,高杨等在中国专利(申 请号200810010115.3)中介绍了海参自溶酶技术: “以海参酶解液的制备方法 为例,其他海珍品,例如鲍鱼、扇贝、牡蛎等海珍品酶解液制备方法与其相同: 海珍品酶解液的制取:利用海参自溶酶技术,用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋 白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶等进行酶解、脱腥得到酶解液”[9]。 “其中海参以菠萝蛋白酶为好” [9]。菠萝蛋白酶(Bromelain,简称菠萝酶,亦称 为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来,经精制、提纯、浓缩、酶 固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。显然 ,在这个海参自溶酶 技术中所用的酶不是从海参中提取得到的,何谈海参自溶酶? 8.海参是一种自溶能力极强的海洋生物,当海参离开水后在短时间内会自己融化 掉,化作水状,溶解地无影无踪,海参在生长8年后,也会自溶在大海里。长期以来, 海参的自溶仅仅被看作是一种神奇的自然现象。海参自溶的机理的研究很少。然 而,科学家的研究应使人们对海参自溶了解更多,而不是利用人们对海参自溶的 不解获取利益。 引用文献 [1]大连工业大学网:http://www.dlpu.edu.cn; 东北新闻网:http://news.nen.com.cn 2007-11-27,15:51:57; 国家科学技术奖励工作办公室网:http://www.nosta.gov.cn/2005jldh/fm/F-211-2-01.htm [2]海参自溶酶技术及其应用 大 连 轻 工 业 学 院 学 报 第26卷:48 [3] MICHAEL ALLABY. "autolysis." A Dictionary of Zoology. 1999. Encyclopedia.com. 5 May. 2009 . [4] R. E. Rowland. The Lysosome, Tuatara, 1970,Volume 18, Issue 1, July [5]刘晓云 陈西广 包振民等. 刺参血系统的超微结构观察与功能探讨,海洋水产研究,2004,25(6):69-72 [6]韩 冰,朱蓓薇. 阴离子交换柱(DEAE252) 层析纯化海参自溶酶,2004, 大连轻工业学院学报 23 (2 ):118-121 [7]朱蓓薇 韩 冰. 海参自溶酶的分离纯化和部分性质研究,2004,食品与发酵工业, 30 (4 ):132-137 [8] 国家知识产权局网站:http://www.sipo.gov.cn [9]朱蓓薇,邵俊杰,高杨等. 2008,中国专利申请号200810010115.3 说明书2/6页 (XYS20110722) ◇◇新语丝(www.xys.org)(xys5.dxiong.com)(www.xinyusi.info)(xys2.dropin.org)◇◇