◇◇新语丝(www.xys.org)(xys4.dxiong.com)(www.xysforum.org)(xys2.dropin.org)◇◇ 　　学习魏于全院士的造假论文，提高识别弄虚作假的科研论文的能力 　　作者：司履生 　　魏于全院士的那两篇弄虚作假的论文，已是木板钉钉的事，是绝对没有办法 否认的事情。不管中国科学院和四川大习学的领导怎么包庇，事实就是事实。 　　魏于全院士造假的技术并不高明，应当说，是十分低级拙劣的，只要稍微有 一点点科研常识，经过很初步的科研训练，或者在攻读博士学位时稍微做过一点 实验都不会漏出这样的没有水平的破绽，简直是让人能笑掉下巴的荒谬的错误。 只有稍微有一点头脑，善于思考，敢于质疑，不迷信海归不迷信教授，权威，更 不迷信院士，而又稍微受过一点生物医学训练的人，就可以看出其中的破绽。但 是，他的论文怎么能忽悠过那么些专家，院士，懂行的领导，甚至能被卫生部评 为当年中国卫生战线的十大事件之一，而且凭着这篇论文获得那么多中国科学院 院士的举手，获得中国科学院院士的头衔。我想，一是，对于绝大部分年轻的科 学工作者，杂志的编审人员来说，主要的就是缺乏质疑的精神，一见是名人署名 的文章，就不敢怀疑，就信以为真，自热而然的成了俘虏，受了骗，上了当。曾 经有一位北大的学人写过一篇网文，说是他们一家三代人中有七位是北大学子， 只有最老的一代一人是49年以前的北大毕业的。说49年以前和以后，北大学子的 最大区别是，49年以前教学生，对什么都要质疑，就是一个疑字，40年以后的学 生是对什么都信。教给学生的就是一个信字。至于对于院士们，尤其是从是生物 医学，特别是免疫学的院士来说，那就是另外的理由了。我想，很可能不是他们 没有水平，最大的可能是私情大于科学精神，也许是为了“互相关照，共同提 高”。我这样想是因为就在我给NATURE Medicine编辑部就魏于全的那篇论文写 那个评论时，就有一位魏于全和我都认识的院士，给我打电话劝我说，“都是熟 人，都是朋友，不要写那个东西了。”我想，中国科学院至今对我所揭露的事实 ，采取不闻不问，敷衍，应付，忽悠的态度，就是很自然的了。 　　最近看到一篇网文，说现在中国政府急于发展中国的医药事业，开创新药研 究，不惜投入巨资。但问题是这个从49年改天换地以后已经有60年历史的，或者 说自改革开放以来已经有了30年历史的中国特色社会主义的中国，怎么竟然做不 出一个新药。这不是太不可思议了吗？只要看看最近国家新药研究班子中魏于全 院士的大名（晒晒新药专项数十亿资金是如何分掉的？作者：孙远 http://www.sciencenet.cn/blog/user_content.aspx?id=249917该文提及“川 大那个颇有争议的魏院士拿了近3亿，饶大校长一共搞了8亿多，陈部长的夫人太 谨慎了，才要了1000万”。），就一点没有必要感到奇怪。我只是觉得中国的纳 税人太可怜，中国人的血汗钱就是这样的连甩也听不到一个响声。 　　尽管现在中国科学院的领导还尽最大的努力包庇魏于全，不过我觉得年轻人， 在读的硕士生，博士生，甚至于博士后，乃至一些年轻的期刊编辑人员，审稿者 还是应当好好读读魏于全院士的那两篇论文，从中可以学到好多东西，一定会大 长见识。 　　魏于全院士的这两篇论文要分析起来很长，我们还得分几次讨论。 　　一，用几万只小鼠进行一次实验，可能吗？ 　　肿瘤动物实验中， 一般一次实验所用的纯种动物多半不超过百只，最多也 就是一二百只。没有人能像魏于全的那个Nature Medicine论文中一下子就要用 数以万计的动物。这在现实中根本没有任何可能，实际上也没有这个必要。 　　魏于全在其论文的材料与方法，建立肿瘤动物模型的一段说，他用不同的内 皮细胞疫苗或T／ＧＨＡ—ＶＳＭＣ以及ＲＰＭＩ７６６６细胞或ＰＢＳ腹腔或 皮下免疫动物，所用剂量是(1x102-1x107 cells/mouse)，内皮细胞他用了ＨＵ ＶＥＣ（原代细胞和ＨＵＶ－ＥＣ－Ｃｓ）和ＨＤＭＶＥＣ以及ＧＥＮ－Ｔ，此 外还使用了ＳＶ４０感染的小鼠淋巴结基质的内皮细胞。经过上述方法免疫的动 物，再给以进行1x105-1x10 7 活肿瘤细胞接种，以观察疫苗对肿瘤的预防作用。 接种的瘤细胞株有Ｍｅｔｈ　Ａ纤维肉瘤，Ｈ２２肝癌，ＭＡ７８２／５Ｓ，Ｆ Ｍ３　Ａ以及Ｌｅｗｉｓ肺癌，一共５种。另一个大组是内皮细胞疫苗的治疗性 实验。对于治疗性实验组，一共建立了五种肿瘤的动物模型，每个肿瘤细胞株是 一组，１０个小鼠，在肿瘤长出以后，用上述疫苗进行治疗，每周两次，连续４ 周，这里他并未指出所使用的疫苗的剂量。我们姑且说他只用了一种剂量，那么 ５种肿瘤每个都用上述的内皮细胞疫苗和几种对照疫苗及ＰＢＳ，一共是８种， 这样一共就应当有５Ｘ８＝４０组，注射PBS的一组动物，可以作为观察肿瘤的 实验条件是否合格的对照。而接种的肿瘤细胞是1个数量级，那么就是40组。每 组10只，就是最少400只。但是如果魏于全院士是按免疫预防组那样进行疫苗接 种的话，那所需动物就更多了。 　　而他的内皮细胞疫苗的预防肿瘤实验，我们就更难说清楚了。按他的叙述， 如果真是像他说的是从1x 102-1x107 cells/小鼠进行一级一级爬坡的话，那么 最少应当是按６个级，这样６个等级，疫苗＋对照疫苗是８种，而试验预防疫苗 预防效果的肿瘤细胞同样是５种，那么总共得多少组动物呢，应当是６Ｘ８Ｘ５ ＝２４０组动物，注射PBS的动物接种肿瘤，观察所用瘤株，动物和实验条件是 否合格的对照，那么就应当是２４0组动物。这样以来魏于全的这一个实验最少 得多少动物，那就是２４０，再乘以１０　，就是２4００只动物。在结果中， 他提到使用了1x105-1x 10 7 三个数量级的肿瘤细胞进行接种，这样就需要7200 只小鼠。那么，整个实验，7200（免疫预防组）+400（免疫治疗组）=7600只。 这是建立动物模型所需动物的最低数量。但是，凡是做过动物实验的人都知道， 要想使实验取得成功，在订购实验动物时，一定要比这个数目大上个百分之二三 十，因为无法保证每一个动物都能使用，比如有的动物过大或过小，接种肿瘤以 后，有的肿瘤未能长出，或者长得不一样大小，过大过小，这些动物都不能使用， 都得剔除掉，更不用说，有的动物中途死亡。所以，订购动物数一定要留有余地。 这样以来，魏于全院士就起码需要10000只动物左右才能开始进行实验。 　　不要忘记了，魏于全院士的实验中还包括了两个需要更多动物的实验，一个 是决定受免疫的动物的免疫球蛋白抗肿瘤效果的在体和体外实验，他的在体实验 是给动物接种肿瘤细胞（1x105-1x107 ）前一天先注射一次和接种后再继续注射 经过内皮细胞疫苗免疫动物的免疫球蛋白3周，每周两次，这样就一共7次，每次 注射剂量是10-300Mg/Kg，而对照组使用的是经过固定的异种内皮细胞（这里， 他未指出用了哪种异种动物和几种异种动物）或VSMC吸收过的免疫球蛋白。这一 组实验加上对照又是多少动物，魏于全并没有描述清楚，他只提了用受免疫动物 的免疫球蛋白，还用了3个不同数量级的肿瘤细胞接种。如果他还是使用了上述 的分组和肿瘤细胞株，那么应当是8种疫苗，外加经过固定的异种内皮细胞或 VSMC吸收的免疫球蛋白，又是两个系列，这样再加上5个肿瘤细胞株，而他接种 的瘤细胞数量是3个级别，这样最少应当是3个不同级别的分组，再说他给动物转 输的过继性抗体，即免疫球蛋白又是从10-300Mg/Kg的不同剂量，这样就得又分 成若干个不同剂量的组，如果按一般规律，应当最少是自10，20，40，80，160， 300Mg，这样的顺序分组，就是6组。那么就得6个10X5X3=800组，每组10个共 8000只小鼠，同样用注射PBS的动物做空白对照。这种体外实验当然需要的免疫 动物的免疫球蛋白量是很小的。所以我们暂且忽略不计，只计算在体实验的部分。 为了给这些动物转输免疫动物的免疫球蛋白，事先得免疫动物 制备免疫球蛋白， 按魏于全的实验设计，得准备注射8000只小鼠所需的免疫球蛋白，即 10-300Mg/Kg除以50（按每个小鼠20g计），再乘7次的免疫球蛋白量。到底制备 这麽多的免疫球蛋白需要多少小鼠呢，因为每株纯种小鼠的血清免疫球蛋白浓度 不同，按一般认为的取个中间数，大约是10mg/ml，每只小鼠的血清不到1ml,约 0.5ml,这还是要采血和分离技术最好的人才能做到。所以每个小鼠只能提供大约 不足5mg的免疫球蛋白，仅就一只小鼠转输的免疫球蛋白一次300mg/kg这一组来 说，一只小鼠一次就需要最少300/50即6mg的免疫球蛋白，免疫7次，就需要 7X6=42mg免疫球蛋白，那么得多少只小鼠为其提供免疫球蛋白，按这样推算仅为 准备这种免疫球蛋白所需的小鼠到底是多少，说起来真让人害怕，还真能把人吓 死。我真不敢计算了。大家可以算一算，8000X42mg的免疫球蛋白，得多少只小 鼠，大约得8000X8，即需要8只小鼠的血清才能够提供一只小鼠所需要的免疫球 蛋白，这样就最低需要约64000只小鼠，这还只是一个只注射300kg/kg 的一组， 还没有算10，20，40，80，160的其它几个级别。这里还需要说明一点，就是我 们不知道他的制备这些免疫球蛋白的动物的免疫方案，如果按他前面说的那种从 1x102-1x107 cells/mouse来进行分组的话，那就更多了。魏于全院士的另一组 实验是删除免疫细胞的在体实验，他分别给用内皮细胞疫苗免疫过的小鼠注射不 同的单克隆抗体以删除CD4，CD8和NK细胞，然后再给动物接种1X106-1x107 瘤细 胞，观察删除免疫细胞以后肿瘤的生长。这又得多少动物呢？应当是最少为3种 不同的单克隆抗体加上对照用的同型免疫球蛋白，一共4组，接种5种瘤细胞， （又是两个不同的数量级）的经内皮细胞疫苗免疫后的动物，如果是前面说过的 8种不同的疫苗以及不同剂量的疫苗，组合起来应当是比以前实验内皮细胞疫苗 免疫性预防肿瘤更多的小鼠，这样说有点让人害怕，退一步说，起码比前面的试 验内皮细胞疫苗的治疗性实验的动物要多四倍以上，约1600只。还有就是这篇论 文中，还提到他用了不同的合成肽进行了动物实验，还有进行了试验抑制血管生 成效果的微囊实验。因为在这些实验中，他的叙述很不细致，无法计算其实验动 物数量，但是单看他的合成肽治疗肿瘤实验，给动物接种的瘤细胞数是 1x105-1x107 来说，也是要分成若干个不同的组的。还有必要指出的是，魏于全 在结果中还有一句是他的预防性疫苗的免疫效果是持久的。“小鼠在免疫后的12 周内，对数次不同起源的瘤细胞接种均能抵抗，都未长出肿瘤。”这些实验少说 也得上百只动物。如此，就是不算做流式细胞，做免疫印记，做免疫组化等所需 的对照动物和屠杀的实验动物，魏于全院士这一组实验最低也需要10万只动物是 没有问题的。我这样说，魏于全院士是承认的。他在一次记者招待会上当有记者 问到他如何能养那么多动物时，他就回答说，他的动物室可以养40000只动物。 当然，魏于全院士的这一实验所用的动物可以是分批买的，但最少的一批也得买 近10000只动物左右。 　　当然魏于全院士是国内外著名学者，又是院士，又是共产党员，得到学校和 地方乃至中央政府重视，经费来源十分充足，盖一个养40000只小鼠的实验动物 大楼并不困难。但问题是，养纯种动物，得买纯种动物，或自己繁殖，这么大的 动物数量得要人，一次买几千只纯种小鼠，乃至一万只纯种小鼠，在那个动物中 心也是买不来的。实验动物中心一般只保存很少几对种子群动物，需要时才按计 划繁殖，扩大成扩大群，进一步再繁殖成生产群。这需要一个过程，而且没有一 个动物中心愿意把扩大群和生产群动物弄得很大，因为这些动物，只用于生产， 不能用于实验，没人买就得杀掉。而繁殖10000只小鼠就得至少要2500对生产群 小鼠，哪个动物中心愿意做这种亏本生意，白白的养上这么多专供生产用的小鼠。 那魏于全院士的动物中心能自己繁殖出这么多的小鼠吗？除非他自己又有一个最 少100多人的动物中心，而且不计成本，否则是不可能的。有了动物不算，还得 管动物的人，更重要的是做实验的人。做实验的人都知道，给动物注射，接种肿 瘤，测量肿瘤大小，采血，都是一个细致活，马虎不得。一个研究生一上午注射 个50-60个动物都是很紧张的。因为得消毒，得取，得拿，得放回笼子里，这都 要时间，那么接种1000只动物就需要差不多20个研究生，接种10000只就得200个 研究生。魏于全院士带的研究生很多，能多到一批招收几百名研究生吗？研究生 越多，指导教师也就越多。在魏于全这篇论文发表的前后，他同时发表了好几篇 论文，每个实验的时间都是重叠的。而且他的实验都是长期观察的。像Nature Medicine这篇论文的实验就是肿瘤长出后观察一年的。这样一来，魏于全院士的 团队得有多大，单是做动物实验的人恐怕得有一个团，一个师的编制吧，还不算 他的生物治疗的临床部分。四川大学当然对魏于全是特别厚爱的。但也不至于就 给他一个人一个团的编制吧，因为四川大学毕竟还是一个综合大学，还有那么多 专业，不是只有一个魏于全的肿瘤生物治疗中心。 　　其实，凡是真正的科学工作者都知道，设计实验时，一定得参考前人的经验， 阅读文献，选出最节省财力人力和时间的实验路线，制订最佳的方案，先做预试 验，再扩大到正式实验，而不是盲目的瞎闯，搞人海战术。魏于全院士的这一个 研究并不是首创性的，关于免疫动物的方案，关于肿瘤接种的记录多得不能再多 了。只要看看文献就完全不会写出这样的纰漏百出的论文。比如说免疫动物用的 细胞数，谁也不会搞这样的1x102-1x 107 cells/小鼠，进行一级一级爬坡的分 组，去试验免疫的效果。即使文献中没有记载，真正的科学工作者也会先进行一 个小规模的预试验，然后再扩大到正式实验。只有白痴和疯子才会一上来就这样 用多种不同的疫苗和不同的肿瘤细胞株，这样盲目的进行实验。从这里可以看出， 我们的新中国的魏于全院士不仅不会做实验，连应当如何设计实验的能力也没有， 这在他的那篇中华肿瘤杂志的文章中就充分暴露了。凡是做过实驗肿瘤的人都知 道黑色素瘤细胞株接种给小鼠以后，20天应当长到多大，决不至于像魏于全论文 中记录的那样，还长不到黄豆大小。博士生的这样拙劣的试验结果，魏于全也看 不出来，还敢发表，还敢授予博士生正式学位。 　　无知者无畏，从这里不难看出，魏于全的这篇论文绝对是臆造出来的。只有 没有真正做过肿瘤实验，或者说没有一点实验肿瘤学常识的人才能，也才敢在看 了几篇洋人的文献，坐在那里想当然，瞎想，空想，然后生编臆造，瞎编出来这 种文章。因为凡是做过肿瘤实验的人或者稍有经验，而心智正常的人是绝对不敢 也不会写出这种文章的。就这样水平，这种德性的院士，中央竟然能让他来做新 药开发研究的领导工作，一笔经费就是2.9个亿，加上配套经费就是5.8个亿，你 说，中国纳税人到底冤还是不冤。 　　这四川大学的领导还敢这样包庇魏于全这样的院士，教授，博士生导师，你 说，怪还是不怪。这当然只能是这种特色的社会主义的中国的产物。这四川大学 的声誉，尤其是华西的声誉让爱护他的人说什么好呢？四川大学的校长，党委书 记难道就不怕被关心这个学校的教师，学生，职工及其他朋友的唾沫星子淹死。 　　中国科学院院长有了像魏于全这样的院士也不知道他晚上夜深人静时，想过 没有，他怎么能对得起那个先进分子的称号，怎么向他的组织汇报他的工作业绩 呢？ 　　大家对遏制学术腐败都很着急。许多人出了不少主意。其实，我觉得十分简 单。只要那个执政党能把它的党员管好，不要造假，不要抄袭，中国的学术腐败 不能说全部绝迹，起码也能少个百分之九十。君不见，像魏于全这样的，像新语 丝上曝光的那些校长，党委书记，市长，还有我说的给我打电话的院士，有几人 不是先进分子？ 　　以上这两段完全是题外话，因为我早已不对在这种体制下能解决这个学术造 假的问题保有任何希望，任何幻想了。 　　最后，还是言归正传，建议年轻的学者和杂志工作人员，在看到这种数量庞 大的动物实验的文章时，要特别提高警惕，别再让这一类的假学者给懵了，骗了。 (XYS20090905) ◇◇新语丝(www.xys.org)(xys4.dxiong.com)(www.xysforum.org)(xys2.dropin.org)◇◇